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朝阳细胞内的物质运输系统实验步骤之哺乳动物细胞的继代培养!

作者: 发布时间:2022-07-02 21:06:02点击:3211

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大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:细胞内的物质运输系统实验步骤

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细胞内的物质运输系统实验步骤之哺乳动物细胞的继代培养!
(一)哺乳动物细胞的继代培养
1. 以摄氏37度水浴预热培养液(含有10 % 胎牛血清之 DMEM培养液 )及 Trypsin (胰蛋白酶)溶液。
2.       以无菌操作方式倒掉旧的培养液,加入1 × PBS溶液(磷酸缓衝液;细胞等张溶液)5 ml,清洗细胞表面。
3.       倒掉清洗液,加入 Trypsin 溶液,静置3分钟,使细胞脱离培养皿表面。
4. 加入含有胎牛血清之培养液5 ml以终止Trypsin的作用后,置入离心机,离心转速为每分钟1500转,共2分钟。
5.       倒掉培养液,加入新鲜的培养液,计数细胞数目后取约2 × 105 个细胞至直径为10 mm的培养皿。补充培养液体积至10 ml后,在培养皿上写上细胞名称、继代数目、日期、细胞数目,将细胞放入二氧化碳培养箱。
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