朝阳显微镜下菌种形态或染色差异-细菌观察研究
作者: 发布时间:2022-07-02 21:02:01点击:1517
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显微镜下菌种形态或染色差异-细菌观察研究
真菌鉴定技术
真菌传统检测方法是由培养基上的菌落外观、显微镜下菌种形态或染色差异等来鉴定
菌种,然而真菌外观极为相近,容易造成鉴定错误,以物种的分类界、门、纲、目、科、
属、种來看,以显微镜鉴定菌种准确性往往只能达到菌属(genus)而不能深入到菌种
(species),但惟有鉴定至菌种才可确认其危害性。加上空气采样真菌的菌量相当可观,生
长速度慢,若要一一鉴定,并不是一项容易的工作。
由于分子技术的开发, 3种常用于菌种之基因鉴定法为:
(1) 聚合酶连锁反应或定量聚合酶连锁反应(polymerase chain reaction, PCR 或
qPCR):可放大每种菌独特之基因片段,也就是只有该种菌种之基因才可被放大
而被侦测到。这种方法受限在一次只能进行一种菌的鉴識,且菌种序列必须为已
知。
(2) DNA 定序法(DNA sequencing):针对菌种部分基因放大后,将该片段基因之核
酸序列以 Sanger 定序法判读出來。这种方法最可确认菌种的正确性,但首要是
溷合二种菌时会造成判读溷亂,故必先确保其为单一菌种。
(3) 限制性片段多样性(restriction fragment length polymorphism, RFLP):先以 PCR 放
大某一基因,再以特定的限制酶(restriction enzyme)进行剪切后,以电泳确认基
因片段大小(size)。由于每种菌剪切之片段不一,可用以分辨菌种。
以上所述的方法,各有其优劣
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